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跟着小编从四大方向探讨液相色谱仪
发布时间:2019-07-17   点击次数:12次
   跟着小编从四大方向探讨液相色谱仪
  液相色谱仪有四方面重要的作用,今天小编就来和大家探讨一下这个知识点。
  一、医药方面
  ①分离分析药物的组合含量:由于一种药剂常含有多组分,色谱方法是既能分离又能定量的方法。如脂溶性维生素片,含有铬维生素,有C18柱及含1%碳酸铵的甲醇为流动相。一次即可将各维生素B6、D1、A、E同时分离并定出含量。又如止痛药或退烧药也可用此法分离并测得各组分的含量。
  ②药物生产中进行中间控制:生产抗菌素时,首先要了解发酵液中的主体与付产物的存在情况。例如:青霉素、四环素、头孢子菌素、红霉素、柔红霉素、庆大霉素等的发酵产物,均可用C18柱和甲醇及缓冲液配制的流动相或用离子对法,分析主体及其收产物的含量。对普鲁卡因酰胺、茶碱等可进行主体含量的测定,对硝酸甘油可测定主体含量及其降解产物,以便保证药物的热量。
  ③分析药物在体内的残量:这是近来研究新药效能很主要的内容之一,如冬凌草甲素是植物中的一组分,有抗癌效果,但是毒性大。测定其在血清中含量很重要,现在可用C18柱及甲醇水为流动相,测定处理后的血清样品,即可得到血中的含量。如磺胺类药品在血清及尿中含量也不允许太大,液相色谱仪可用C18柱及酸性乙醇为流动相,测定含量后,则可估计最合适的用药剂量。又如四环素、巴比妥酸、止痛药、退烧药、护糖尿病的药物等,在血或尿中的含量都可用C18柱用甲醇、水为流动相来测定含量。因此,反相色谱法应用范围极广。
  ④测定药物在各种器官中的代谢产物,特别是研究药物的代谢产物在血清中存在的情况。如测血清中的酮酸及戊二酸。测尿中代谢产物更为方便,不需要繁锁的预处理。因为研究尿中的组分能鉴别病人的代谢功能,对病理研究或监床诊断均具有重要的参考价值。
  二、生化方面
  主要方向是分析嘌呤、嘧啶基的核甙或核甙酸及具有相应的肽和蛋白质。
  ①在细胞核中有种类繁多的甙及核甙酸,可用不同的检测器或酶转移检测器或利用酶反应进行定性测定。用离子交换柱和缓冲游泳梯度淋洗。C18柱用含磷酸的缓冲水溶液的梯度淋洗法均能得到满意的结果。
  ②分析核酸近年来有关分析核酸的研究很多,主要是分离RNA、DNA及碎片。现在使用硅烷化的硅藻土或长碳链季胺盐涂渍=在上面制成系列填充柱。已能分离t-RNA,r-RNA及DNV碎片。有没的缓冲液淋洗,还可利用此技术做RNA碎片的序列分离制备工具,对生物研究起了重要的作用。
  ③氨基酸、肽、蛋白质的分析,氨基酸分析主要是制成荧光衍生物或酰氯的衍生物,然后测定其序列。近来也可用高效液相色谱的柱后衍生物法测定其序列。操作简便、速度快、深受欢迎。用四烷基氯化胺肽形成离子对或高效凝胶色谱测定蛋白质,其分离效果也很好。
  (补充下:氨基酸用液相检测,需用柱前衍生法和柱后衍生法来处理样品,可参照《氨基酸色谱分离方法简析》)液相色谱仪
  ④酶的分析,酶是在血清及其他生理样品中常有的反应产物,化学分析法操作不便,易造成误差,用色谱技术分析,具有操作简便、快速、准确的特点。如测定碱性或酸性磷酸酶的含量,测定反应产物中腺甙脱 胺酶的含量等,目前对酶用色谱法分离分析的研究工作已开展很多。
  ⑤糖的分析,糖的分析是其它方法较难完成的。如把糖与硼酸缓冲液预选混合,使生成糖-硼酸络合离子,再进行分离。可把蔗乳糖、阿芦糖、果糖、阿拉伯糖、岩藻糖、半乳糖、山梨糖、木糖、葡萄糖等几十种,全部分开。也可用胺基柱分离各种天然产物中伯糖的各绷分。
  三、天然产物中主要组分的分析
  天然物的组分非常复杂,如中草药中各组分含量多少对药剂作用影响很大。用此技术分离分析,具有简便、快速的特点。氨基柱能分离分析天然物中糖的组分。氰基柱能分离中药紫草及其衍生物的组成。硅胶柱能测定成药中马钱了碱、苦碱等含量。C18柱分离丹参中主要组分儿茶酚、桂皮中桂皮酸、烟草中的酚类化合物、麦角或鸦片中各种植物碱,这些都是近来日益受到重视的结果。
  以植提行业为例,涉及的成分大致可分为以下几大类:
  1.生物碱类:即植物碱,一种碱性含氮有机化合物,有显著的生物活性或毒性,是中草药重要的有效成分。
  2.黄酮类:黄酮类化合物广泛存在于植物的各个部位,尤其是花、叶部位, 约20%的中草药中都含有黄酮类化合物,资源丰富。
  3.多糖类:大于10个单糖组成的多糖化合物。如淀粉、纤维素
  4.苷类:糖与一种物质(酚类、黄酮类)结合而成的物质
  5.有机酸类
  6.发油类:具有挥发性,可随水蒸汽蒸馏出来的油状液体,大部分具有香气
  该行业均有使用到液相(分析成分,含量),气相(分析成分,含量,农残)及质谱等仪器的潜力,但不同规模的企业对仪器的需求差别很大。目前国家没有针对性的标准,主要以国家标准(2010版)为参考。
  四、食品分析
  分析食品或动物饲料中的嘌维生素含量,是当前食品工业中的重要课题。分析食品中的黄曲霉素及各种香料,又是生产中的常用课题。如今此技术已在分析咖啡中的黄嘌泠、调料中的核甙酸及核甙、果汁中的有机酸、米中的维生素、牛奶中的维生素D等都对食品营养价值提供有效数据。
  液相色谱仪分析食品中比如苹果中农药萘乙酸、牛奶中的有毒成分。
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